厭氧培養(yǎng)箱操作使用流程及注意事項(xiàng)

厭氧培養(yǎng)箱操作使用流程及注意事項(xiàng)

?一、操作使用流程?

?準(zhǔn)備工作?

將設(shè)備放置在溫差小、遠(yuǎn)離熱源且平穩(wěn)的位置，連接氮?dú)馄亢突旌蠚馄浚∟? 85%、H? 10%、CO? 5%），檢查氣路密封性?。

清潔箱體內(nèi)部及手套、托盤等配件，確保無污染；檢查鈀催化劑是否有效?。

?啟動(dòng)與厭氧環(huán)境形成?

接通電源，開啟照明燈和溫控儀，設(shè)置目標(biāo)溫度（通常35–37℃）?。

?氣體置換流程?：

?第一次氮?dú)庵脫Q?：向操作室充入氮?dú)猓故痔坠钠鸷笤o袋口，重復(fù)三次以降低氧含量?。

?混合氣體置換?：通入混合氣體（N?/H?/CO?），通過流量計(jì)控制流量至10ml/min，重復(fù)2–3次確保氧濃度極低?。

啟用鈀催化劑和除氧裝置，1小時(shí)后用美蘭指示劑檢測氧濃度（不變色表示達(dá)標(biāo)）?。

?樣品操作與培養(yǎng)?

通過緩沖室傳遞樣品：先抽真空（≥66kPa），再充入氮?dú)饣蚧旌蠚怏w，重復(fù)2–3次以維持無氧狀態(tài)?。

穿戴手套操作樣品，避免空氣進(jìn)入；培養(yǎng)期間定期監(jiān)測溫度、濕度和氧濃度?。

?結(jié)束操作?

通過緩沖室取出樣品，清潔箱內(nèi)殘留物，關(guān)閉電源及氣源?。

?二、關(guān)鍵注意事項(xiàng)?

?安全與維護(hù)?

?氣路檢查?：定期檢測氣瓶、管道是否漏氣，更換氣瓶時(shí)扎緊氣管防止氧氣滲入?。

?催化劑維護(hù)?：鈀粒需定期更換或再生，確保催化除氧效率?。

?密封性驗(yàn)證?：操作前檢查手套、門縫密封條，抽真空后確認(rèn)壓力恢復(fù)時(shí)間?。

?環(huán)境控制?

箱內(nèi)物品不宜過多，避免阻擋風(fēng)道影響溫度均勻性；長期使用需每日檢查氧濃度?。

滅菌時(shí)開啟紫外線燈，時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)定?。

?設(shè)備保養(yǎng)?

停止使用時(shí)，設(shè)定40℃以上運(yùn)行2小時(shí)，每半小時(shí)開門10分鐘以干燥箱體?。

定期校準(zhǔn)溫度、氧濃度傳感器，清潔冷凝水防止傳感器誤差?。

?安全警示?

操作含氫氣的混合氣體時(shí)需遠(yuǎn)離明火，防爆防火?。

避免放置易燃、腐蝕性物品，確保設(shè)備散熱空間充足?。

以上流程及注意事項(xiàng)整合了設(shè)備安裝、環(huán)境控制、樣品操作和長期維護(hù)的關(guān)鍵步驟，需嚴(yán)格遵循以確保厭氧環(huán)境穩(wěn)定性和實(shí)驗(yàn)安全性

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